Comprendre l'évolution d'une cellule ectodermique indifférenciée en une cellule neurale

Récupération des amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, après tamisage. Ils ont été collectés en mer et maintenus en culture dans des aquariums avec des conditions particulières (un fond de sable, une température constante de 17 °C et un cycle de lumière jour/nuit). La veille du jour choisi pour déclencher la ponte des amphioxus, le sable est tamisé afin de récupérer les animaux des aquariums. Ils seront ensuite incubés à 23 °C pendant 24h avec…

Amphioxus, "Branchiostoma lanceolatum", petits animaux marins de quelques centimètres qui ont été collectés en mer. Ils sont maintenus en culture dans des aquariums avec un fond de sable, une température constante de 17 °C et un cycle de lumière jour/nuit (16h-8h). Ces recherches s'inscrivent dans le cadre du projet "Neucecho" dont l'objectif est de comprendre les différentes étapes qui conduisent une cellule ectodermique (feuillet externe de l'embryon) indifférenciée, à devenir une cellule…

Tamisage des amphioxus, "Branchiostoma lanceolatum", petits animaux marins de quelques centimètres. Ils ont été collectés en mer et maintenus en culture dans des aquariums avec des conditions particulières (un fond de sable, une température constante de 17 °C et un cycle de lumière jour/nuit). La veille du jour choisi pour déclencher la ponte des amphioxus, le sable est tamisé afin de récupérer les animaux des aquariums. Ils seront ensuite incubés à 23 °C pendant 24h avec le même cycle jour…

Tamisage des amphioxus, "Branchiostoma lanceolatum", petits animaux marins de quelques centimètres. Ils ont été collectés en mer et maintenus en culture dans des aquariums avec des conditions particulières (un fond de sable, une température constante de 17 °C et un cycle de lumière jour/nuit). La veille du jour choisi pour déclencher la ponte des amphioxus, le sable est tamisé afin de récupérer les animaux des aquariums. Ils seront ensuite incubés à 23 °C pendant 24h avec le même cycle jour…

Tamisage des amphioxus, "Branchiostoma lanceolatum", petits animaux marins de quelques centimètres. Ils ont été collectés en mer et maintenus en culture dans des aquariums avec des conditions particulières (un fond de sable, une température constante de 17 °C et un cycle de lumière jour/nuit). La veille du jour choisi pour déclencher la ponte des amphioxus, le sable est tamisé afin de récupérer les animaux des aquariums. Ils seront ensuite incubés à 23 °C pendant 24h avec le même cycle jour…

Tamisage des amphioxus, "Branchiostoma lanceolatum", petits animaux marins de quelques centimètres. Ils ont été collectés en mer et maintenus en culture dans des aquariums avec des conditions particulières (un fond de sable, une température constante de 17 °C et un cycle de lumière jour/nuit). La veille du jour choisi pour déclencher la ponte des amphioxus, le sable est tamisé afin de récupérer les animaux des aquariums. Ils seront ensuite incubés à 23 °C pendant 24h avec le même cycle jour…

Récupération des amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, après tamisage. Ils ont été collectés en mer et maintenus en culture dans des aquariums avec des conditions particulières (un fond de sable, une température constante de 17 °C et un cycle de lumière jour/nuit). La veille du jour choisi pour déclencher la ponte des amphioxus, le sable est tamisé afin de récupérer les animaux des aquariums. Ils seront ensuite incubés à 23 °C pendant 24h avec…

Individualisation dans des gobelets des amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, avant la ponte. À l’aide d’une épuisette, les amphioxus sont récupérés et placés individuellement dans des gobelets en plastique posés sur un fond noir et remplis d’un volume d’eau de mer. Cette manipulation a lieu l’après-midi du jour suivant le choc thermique déclenché par les scientifiques. C’est dans ces gobelets qu’aura lieu la ponte des amphioxus. Ces recherches…

Individualisation dans des gobelets des amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, avant la ponte. À l’aide d’une épuisette, les amphioxus sont récupérés et placés individuellement dans des gobelets en plastique posés sur un fond noir et remplis d’un volume d’eau de mer. Cette manipulation a lieu l’après-midi du jour suivant le choc thermique déclenché par les scientifiques. C’est dans ces gobelets qu’aura lieu la ponte des amphioxus. Ces recherches…

Individualisation dans des gobelets des amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, avant la ponte. À l’aide d’une épuisette, les amphioxus sont récupérés et placés individuellement dans des gobelets en plastique posés sur un fond noir et remplis d’un volume d’eau de mer. Cette manipulation a lieu l’après-midi du jour suivant le choc thermique déclenché par les scientifiques. C’est dans ces gobelets qu’aura lieu la ponte des amphioxus. Ces recherches…

Individualisation dans des gobelets des amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, avant la ponte. À l’aide d’une épuisette, les amphioxus sont récupérés et placés individuellement dans des gobelets en plastique posés sur un fond noir et remplis d’un volume d’eau de mer. Cette manipulation a lieu l’après-midi du jour suivant le choc thermique déclenché par les scientifiques. C’est dans ces gobelets qu’aura lieu la ponte des amphioxus. Ces recherches…

Vérification de la ponte des amphioxus, "Branchiostoma lanceolatum", petits animaux marins de quelques centimètres. La lumière de la salle a été éteinte à 21h pour permettre le déclenchement de leur ponte. La présence ou l'absence de ponte dans chacun des gobelets est contrôlée à l'aide d'une lumière rouge, pour ne pas déranger les animaux. Environ une heure après l’extinction de la lumière les amphioxus, qui ont été placés individuellement dans des gobelets, relâchent naturellement leurs œufs …

Vérification de la ponte des amphioxus, "Branchiostoma lanceolatum", petits animaux marins de quelques centimètres. La lumière de la salle a été éteinte à 21h pour permettre le déclenchement de leur ponte. La présence ou l'absence de ponte dans chacun des gobelets est contrôlée à l'aide d'une lumière rouge, pour ne pas déranger les animaux. Environ une heure après l’extinction de la lumière les amphioxus, qui ont été placés individuellement dans des gobelets, relâchent naturellement leurs œufs …

Vérification de la ponte des amphioxus, "Branchiostoma lanceolatum", petits animaux marins de quelques centimètres. La lumière de la salle a été éteinte à 21h pour permettre le déclenchement de leur ponte. La présence ou l'absence de ponte dans chacun des gobelets est contrôlée à l'aide d'une lumière rouge, pour ne pas déranger les animaux. Environ une heure après l’extinction de la lumière les amphioxus, qui ont été placés individuellement dans des gobelets, relâchent naturellement leurs œufs …

Observation de la ponte d'une femelle amphioxus, "Branchiostoma lanceolatum", petits animaux marins de quelques centimètres. Chaque femelle peut pondre environ 3000 œufs. La lumière de la salle a été éteinte à 21h pour permettre le déclenchement de sa ponte. Environ une heure après l’extinction de la lumière les amphioxus, qui ont été placés individuellement dans des gobelets, relâchent naturellement leurs œufs (non fécondés) et du sperme, selon leur sexe (mâle ou femelle). Les scientifiques…

Observation de la ponte d'une femelle amphioxus, "Branchiostoma lanceolatum", petits animaux marins de quelques centimètres. Chaque femelle peut pondre environ 3000 œufs. La lumière de la salle a été éteinte à 21h pour permettre le déclenchement de sa ponte. Environ une heure après l’extinction de la lumière les amphioxus, qui ont été placés individuellement dans des gobelets, relâchent naturellement leurs œufs (non fécondés) et du sperme, selon leur sexe (mâle ou femelle). Les scientifiques…

Annotation des échantillons de prélèvements d'œufs d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, pour la fécondation. Les œufs (non fécondés) sont récupérés à l’aide d’une micropipette, puis fécondés avec une goutte de sperme dans des boîtes de Petri. Les échantillons sont ensuite observés sous la loupe binoculaire de manière à vérifier que la fécondation s’est bien effectuée. Ces recherches s'inscrivent dans le cadre du projet "Neucecho" dont l…

Boîtes de pétri numérotées contenant les œufs fécondés d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres. Les œufs (non fécondés) sont récupérés à l’aide d’une micropipette, puis fécondés avec une goutte de sperme dans les boîtes de Petri. Les échantillons sont ensuite observés sous la loupe binoculaire de manière à vérifier que la fécondation s’est bien effectuée. Ces recherches s'inscrivent dans le cadre du projet "Neucecho" dont l'objectif est de…

Vérification de la fécondation d'œufs d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres,. Les œufs (non fécondés) sont récupérés à l’aide d’une micropipette, puis fécondés avec une goutte de sperme dans les boîtes de Petri. Les échantillons sont ensuite observés sous la loupe binoculaire de manière à vérifier que la fécondation s’est bien effectuée. Ces recherches s'inscrivent dans le cadre du projet "Neucecho" dont l'objectif est de comprendre les…

Vérification de la fécondation d'œufs d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres,. Les œufs (non fécondés) sont récupérés à l’aide d’une micropipette, puis fécondés avec une goutte de sperme dans les boîtes de Petri. Les échantillons sont ensuite observés sous la loupe binoculaire de manière à vérifier que la fécondation s’est bien effectuée. Ces recherches s'inscrivent dans le cadre du projet "Neucecho" dont l'objectif est de comprendre les…

Vérification de la fécondation d'œufs d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres,. Les œufs (non fécondés) sont récupérés à l’aide d’une micropipette, puis fécondés avec une goutte de sperme dans les boîtes de Petri. Les échantillons sont ensuite observés sous la loupe binoculaire de manière à vérifier que la fécondation s’est bien effectuée. Ces recherches s'inscrivent dans le cadre du projet "Neucecho" dont l'objectif est de comprendre les…

Préparation de boîtes de Petri pour la micro-injection d'œufs fécondés d'amphioxus, "Branchiostoma lanceolatum", petits animaux marins de quelques centimètres. Elles contiennent de l’agarose à 1% en eau de mer, dans lesquelles un sillon de 70 µm de profondeur a été réalisé pour y placer les œufs. La micro injection consiste à introduire dans l’œuf fécondé (qui mesure entre 80 et 100 µm) un volume très petit du mix contenant les molécules qui vont guider l’enzyme Cas9 vers le gène cible, ainsi…

Préparation de boîtes de Petri pour la micro-injection d'œufs fécondés d'amphioxus, "Branchiostoma lanceolatum", petits animaux marins de quelques centimètres. Elles contiennent de l’agarose à 1% en eau de mer, dans lesquelles un sillon de 70 µm de profondeur a été réalisé pour y placer les œufs. La micro injection consiste à introduire dans l’œuf fécondé (qui mesure entre 80 et 100 µm) un volume très petit du mix contenant les molécules qui vont guider l’enzyme Cas9 vers le gène cible, ainsi…

Préparation d’une aiguille de micro injection à l’aide d’une étireuse. Cette machine de haute précision permet d’étirer le capillaire en borosilicate (verre) jusqu’à ce qu’il se sépare en deux (par l'action de la force d’étirement combinée au chauffage capillaire à très haute température), formant une pointe extrêmement fine. Cette machine est calibrée de manière à ce que le processus d'étirement du capillaire se déroule à chaque fois exactement de la même manière. Les aiguilles produites…

Préparation d'un mélange de micro injection qui contient à la fois des molécules d’ARN très courtes (ARN guide) qui vont reconnaitre spécifiquement le gène étudié, ainsi que la Cas9, l’enzyme qui coupe l’ADN du gène reconnu. Une aiguille permettra l’introduction d’un volume extrêmement petit du mélange d’injection à l’intérieur des œufs fécondés d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres. Pour cette étape, les œufs ont été placés délicatement dans…

Préparation d'un mélange de micro injection qui contient à la fois des molécules d’ARN très courtes (ARN guide) qui vont reconnaitre spécifiquement le gène étudié, ainsi que la Cas9, l’enzyme qui coupe l’ADN du gène reconnu. Une aiguille permettra l’introduction d’un volume extrêmement petit du mélange d’injection à l’intérieur des œufs fécondés d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres. Pour cette étape, les œufs ont été placés délicatement dans…

Préparation d'un mélange de micro injection qui contient à la fois des molécules d’ARN très courtes (ARN guide) qui vont reconnaitre spécifiquement le gène étudié, ainsi que la Cas9, l’enzyme qui coupe l’ADN du gène reconnu. Une aiguille permettra l’introduction d’un volume extrêmement petit du mélange d’injection à l’intérieur des œufs fécondés d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres. Pour cette étape, les œufs ont été placés délicatement dans…

Préparation d'un mélange de micro injection qui contient à la fois des molécules d’ARN très courtes (ARN guide) qui vont reconnaitre spécifiquement le gène étudié, ainsi que la Cas9, l’enzyme qui coupe l’ADN du gène reconnu. Une aiguille permettra l’introduction d’un volume extrêmement petit du mélange d’injection à l’intérieur des œufs fécondés d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres. Pour cette étape, les œufs ont été placés délicatement dans…

Placement d'œufs fécondés d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, dans un sillon de 70µm de profondeur, créé dans l’agarose à 1% en eau de mer préparé dans une boîte de Petri. Ces recherches s'inscrivent dans le cadre du projet "Neucecho" dont l'objectif est de comprendre les différentes étapes qui conduisent une cellule ectodermique (feuillet externe de l'embryon) indifférenciée, à devenir une cellule neurale (du système nerveux) au cours du…

Placement d'œufs fécondés d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, dans un sillon de 70µm de profondeur, créé dans l’agarose à 1% en eau de mer préparé dans une boîte de Petri. Ces recherches s'inscrivent dans le cadre du projet "Neucecho" dont l'objectif est de comprendre les différentes étapes qui conduisent une cellule ectodermique (feuillet externe de l'embryon) indifférenciée, à devenir une cellule neurale (du système nerveux) au cours du…

Placement d'œufs fécondés d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, dans un sillon de 70µm de profondeur, créé dans l’agarose à 1% en eau de mer préparé dans une boîte de Petri. Ces recherches s'inscrivent dans le cadre du projet "Neucecho" dont l'objectif est de comprendre les différentes étapes qui conduisent une cellule ectodermique (feuillet externe de l'embryon) indifférenciée, à devenir une cellule neurale (du système nerveux) au cours du…

Micro injection d'œufs fécondés d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, à l’aide d’un micromanipulateur et d’un micro injecteur. Le micromanipulateur permet à l'aiguille de se déplacer de manière extrêmement délicate et contrôlée sur des distances inférieures à 1 µm. Le micro-injecteur est une machine qui produit des impulsions de pression contrôlées pendant un temps contrôlé, afin d'injecter le volume approprié du mélange d'injection dans l'œuf…

Micro injection d'œufs fécondés d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, à l’aide d’un micromanipulateur et d’un micro injecteur. Le micromanipulateur permet à l'aiguille de se déplacer de manière extrêmement délicate et contrôlée sur des distances inférieures à 1 µm. Le micro-injecteur est une machine qui produit des impulsions de pression contrôlées pendant un temps contrôlé, afin d'injecter le volume approprié du mélange d'injection dans l'œuf…

Micro injection d'œufs fécondés d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, à l’aide d’un micromanipulateur et d’un micro injecteur. Le micromanipulateur permet à l'aiguille de se déplacer de manière extrêmement délicate et contrôlée sur des distances inférieures à 1 µm. Le micro-injecteur est une machine qui produit des impulsions de pression contrôlées pendant un temps contrôlé, afin d'injecter le volume approprié du mélange d'injection dans l'œuf…

Micro injection d'œufs fécondés d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, à l’aide d’un micromanipulateur et d’un micro injecteur. Le micromanipulateur permet à l'aiguille de se déplacer de manière extrêmement délicate et contrôlée sur des distances inférieures à 1 µm. Le micro-injecteur est une machine qui produit des impulsions de pression contrôlées pendant un temps contrôlé, afin d'injecter le volume approprié du mélange d'injection dans l'œuf…

Micro injection d'œufs fécondés d’amphioxus ("Branchiostoma lanceolatum"), petits animaux marins de quelques centimètres, à l’aide d’un micromanipulateur et d’un micro injecteur. Le micromanipulateur permet à l'aiguille de se déplacer de manière extrêmement délicate et contrôlée sur des distances inférieures à 1 µm. Le micro-injecteur est une machine qui produit des impulsions de pression contrôlées pendant un temps contrôlé, afin d'injecter le volume approprié du mélange d'injection dans l'œuf…