Prélèvement d'un échantillon de "Nicotiana benthamiana" pour son observation au microscope

Prélèvement d'un échantillon de feuille de "Nicotiana benthamiana" pour son observation au microscope confocal en vue d'une expérience de FRET-FLIM. Le FRET-FLIM est la combinaison du transfert d’énergie par résonance Förster (FRET) à de la microscopie d'imagerie à durée de vie par fluorescence (FLIM). La durée de vie de fluorescence d'un fluorophore (FLT) est un paramètre qui peut mettre en évidence des différences dans l'environnement entourant la protéine qui y est accrochée. Parmi ces différences on peut y inclure une interaction avec une protéine fusionnée à un autre fluorophore, on parle alors de la technique de FLIM-FRET. Le FRET a lieu quand 2 fluorophores sont très proches (<10nm) l'une de l'autre, il y a alors transfert d’énergie. Ce dernier peut être détecté par différence de la durée de vie et visualisé par FLIM, une technique d'imagerie basée sur les différences de taux de décroissance exponentielle de l'émission de photons d'un fluorophore à partir d'un échantillon. La durée de vie de fluorescence (FLT) du fluorophore, plutôt que son intensité, est utilisée pour créer l'image dans FLIM. Cette technique fournit des informations précises sur les interactions protéine-protéine dans les cellules vivantes.