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Origine et fonction du générateur hypophysaire de pulses d'hormone de croissance

L'objectif du projet GH-GEN est de mieux comprendre le fonctionnement in vivo des cellules GH en étudiant le dialogue entre l'hypothalamus (partie du cerveau) et l'hypophyse (glande endocrine).

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Ce mécanisme est à la genèse des pics réguliers de sécrétion, appelés pulses, de l'hormone de croissance (GH). Sa sécrétion joue un rôle crucial dans la croissance corporelle et la régulation du métabolisme. Ce reportage a été réalisé et financé dans le cadre de l'appel à projet Sciences Avec et Pour la Société (SAPS)
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Micropipettes de dextrans fluorescents

Micropipettes de dextrans fluorescents pour étudier, in vivo, la diffusion intra-tissulaire de l'hormone de croissance (GH) sécrétée. Les scientifiques utilisent du dextran, un sucre inerte comparable en taille à l'hormone GH, marqué avec une sonde fluorescente et injecté à un modèle murin anesthésié. Afin de précisément définir le profil de distribution de l’hormone GH sécrétée dans l'hypophyse et sa capture par les vaisseaux sanguins, l’équipe compare les injections de dextrans fluorescents…

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Micropipettes de dextrans fluorescents
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Prélèvement sanguin sur un modèle murin éveillé et libre de ses mouvements

Prélèvement sanguin sur un modèle murin éveillé et libre de ses mouvements. Des échantillons d’environ 4 microlitres sont prélevés régulièrement (toutes les 5 à 30 minutes) sur sa queue. Ils permettent aux scientifiques d’étudier la sécrétion de l’hormone de croissance (GH) et d’identifier les pics de sécrétion au cours de la journée. Leur but est de corréler, pour la première fois, les signaux qui déclenchent la sécrétion de l'hormone GH dans les cellules, avec les taux d'hormone GH présents…

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Prélèvement sanguin sur un modèle murin éveillé et libre de ses mouvements
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Préparation d’une manipulation pour étudier la diffusion intra-tissulaire de l’hormone de croissance

Préparation d’une manipulation pour étudier, in vivo, la diffusion intra-tissulaire de l’hormone de croissance (GH) sécrétée. Elle est libérée dans le tissu hypophysaire avant d'être distribuée aux organes cibles par les vaisseaux sanguins. Pour reproduire ce mécanisme, les scientifiques utilisent du dextran, un sucre inerte, marqué avec une sonde fluorescente et injecté par micropipette à un modèle murin anesthésié. Cette molécule, comparable en termes de taille à l'hormone GH, mime leur…

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Préparation d’une manipulation pour étudier la diffusion intra-tissulaire de l’hormone de croissance
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Dosage de micro-échantillons de sang par technique ELISA sur une plaque 96 puits

Dosage de micro-échantillons de sang par technique ELISA sur une plaque 96 puits. Après avoir prélevé 4 microlitres de sang sur la queue de souris éveillées, les scientifiques réalisent un dosage par ELISA de type sandwich pour détecter l'hormone de croissance (GH) dans les échantillons. Avec cette technique de dosage immunologique ultrasensible, l'hormone est piégée entre un anticorps de capture, fixé au fond des puits, et un anticorps de détection. L'ajout d'un substrat contenant un anticorps…

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Dosage de micro-échantillons de sang par technique ELISA sur une plaque 96 puits
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Dosage de micro-échantillons de sang par technique ELISA sur une plaque 96 puits

Dosage de micro-échantillons de sang par technique ELISA sur une plaque 96 puits. Après avoir prélevé 4 microlitres de sang sur la queue de souris éveillées, les scientifiques réalisent un dosage par ELISA de type sandwich pour détecter l'hormone de croissance (GH) dans les échantillons. Avec cette technique de dosage immunologique ultrasensible, l'hormone est piégée entre un anticorps de capture, fixé au fond des puits, et un anticorps de détection. L'ajout d'un substrat contenant un anticorps…

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Dosage de micro-échantillons de sang par technique ELISA sur une plaque 96 puits
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Dosage de micro-échantillons de sang par technique ELISA sur une plaque 96 puits

Dosage de micro-échantillons de sang par technique ELISA sur une plaque 96 puits. Après avoir prélevé 4 microlitres de sang sur la queue de souris éveillées, les scientifiques réalisent un dosage par ELISA de type sandwich pour détecter l'hormone de croissance (GH) dans les échantillons. Avec cette technique de dosage immunologique ultrasensible, l'hormone est piégée entre un anticorps de capture, fixé au fond des puits, et un anticorps de détection. L'ajout d'un substrat contenant un anticorps…

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Dosage de micro-échantillons de sang par technique ELISA sur une plaque 96 puits
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Dosage de micro-échantillons de sang par technique ELISA sur une plaque 96 puits

Dosage de micro-échantillons de sang par technique ELISA sur une plaque 96 puits. Après avoir prélevé 4 microlitres de sang sur la queue de souris éveillées, les scientifiques réalisent un dosage par ELISA de type sandwich pour détecter l'hormone de croissance (GH) dans les échantillons. Avec cette technique de dosage immunologique ultrasensible, l'hormone est piégée entre un anticorps de capture, fixé au fond des puits, et un anticorps de détection. L'ajout d'un substrat contenant un anticorps…

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Dosage de micro-échantillons de sang par technique ELISA sur une plaque 96 puits
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Immobilisation de poissons-zèbres sous une goutte d’agarose pour les étudier au microscope

Immobilisation de poissons-zèbres sous une goutte d’agarose pour les étudier au microscope. Les chercheurs regardent ici l’activité des cellules lors du développement du poisson, notamment la migration des neurones et la mise en place du réseau neuronal hypothalamique. Le poisson-zèbre a la caractéristique d’avoir un développement embryonnaire très rapide ainsi qu’un corps transparent. Il permet ainsi d’étudier et d’imager facilement in vivo les mécanismes cellulaires à l’œuvre, notamment le…

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Immobilisation de poissons-zèbres sous une goutte d’agarose pour les étudier au microscope
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Installation de larves de poissons-zèbre immobilisées sous un microscope multi-photonique

Installation des larves de poissons-zèbre immobilisées dans une goutte d'agarose sous un microscope multi-photonique. Cette technique permet de visualiser et d’étudier la migration des neurones hypothalamiques mais aussi les signaux calciques qui déclenchent la libération de neurohormones dans ces neurones. La microscopie à deux photons permet ensuite d’obtenir des séquences d’images et des piles d’images en 3D du tissu nerveux ou d’organes, directement en profondeur (jusqu’à 200 microns dans…

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Installation de larves de poissons-zèbre immobilisées sous un microscope multi-photonique
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Visualisation directe in vivo de l’activité de neurones hypothalamiques de poissons-zèbres

Visualisation directe in vivo de l’activité de neurones hypothalamiques de poissons-zèbres, par microscopie multi-photonique intravitale. Cette technique permet d'observer comment les cellules (signaux calciques) s’organisent dans des groupes de neurones pour migrer vers l’hypothalamus. Une fois dans ce dernier, elles libèrent leurs neurohormones qui contrôlent les sécrétions hypophysaires, comme l’hormone de croissance (GH). Ce projet a permis de mettre en lumière des éléments clé du dialogue …

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Visualisation directe in vivo de l’activité de neurones hypothalamiques de poissons-zèbres

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